驗證方案的審批
項目（Items）   內容（Content）	姓名 （Name）	部門/職位（Dep./Post）	簽名 （Signature）	日期 （Date）
起草人 （Prepared by）		QC
審核人 (Reviewed by)	梁召權	設備部
審核人 (Reviewed by)	柴景明	質量部
批準人 (Approved by)	于紅梅	質量負責人

 
 
 
 

目 錄
 
1 目的3
2 范圍3 
3 概述3
4 驗證類別5
5 驗證前準備5
5.1驗證人員及職責5
5.2驗證引用文件的確認6
5.3儀器儀表校驗的確認6
6 驗證內容及合格標準7
6.1相關條件的確認7
6.2驗證步驟8
6.3驗證合格標準10
6.4數據統計及分析11
7 偏差分析11
8 變更處理11
9  驗證結論及評價11
10 再驗證周期11
11 文件修訂12
12 附錄及附表12
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1目的
本驗證是為了確認滅菌器的各種功能可以達到生產要求，設備能夠在預定的操作范圍之內穩定運行，其性能滿足生產工藝的要求。
2范圍
本驗證范圍是確認微生物實驗室滅菌柜能夠滿足生理鹽水、微生物檢測用具等物品的滅菌要求，此次驗證主要包括空載熱分布測試、滿載熱分布測試、滿載熱穿透實驗。
此驗證方案計劃于2014年1月17日-10月25日給予實施。
3 概述
3.1 設備描述

設備名稱	壓力蒸汽滅菌器	設備編號
制造商		滅菌容積		150L
安裝地點		材質
設備結構描述	設備主要由主體、密封圈、滅菌筐、加熱盤管幾部分組成。
主要技術參數	最高工作壓力		0.165MPa
	額定工作溫度		125℃
	熱均勻度		≤±1℃
	電源電壓		220V50Hz
	電熱管功率		4．5KW
工作原理描述	預熱階段：將水溫升至100℃。 升溫階段：放入物品后繼續加熱，使柜內溫度逐漸升高。 滅菌階段：升溫至設定值后，保持一定時間滅菌。 冷卻階段：排放內部蒸汽。 結束：當柜內壓力達到安全壓力時，工作結束。
主要用途	用于*******等物品的滅菌。

3.2滅菌程序描述

滅菌程序采用不低于121℃，30min。濕熱滅菌程序包括以下階段或步驟：
ü 通飽和蒸汽；
ü 加熱；
ü 滅菌；
ü 冷卻。
實現滅菌的三個重要條件分別是：溫度，時間和飽和蒸汽。
典型的滅菌T~t曲線如下：
 

3.3驗證方法學描述

3.4 D、Z、F0值
D值是微生物的耐熱參數，是指在一定溫度下將微生物殺滅90%，即使之下降一個對數單位所需的時間。D值越大，微生物耐熱性越強。
Z值是滅菌溫度系數，是指某一種微生物的D值變化一個對數單位，滅菌溫度應升高或下降的度數。其描述的是微生物對溫度變化的敏感程度，Z值越大，微生物對溫度變化的敏感程度越弱；通常Z取10。
F0值為121℃下的標準滅菌時間。滅菌采用過度殺滅（Over Kill）的概念，即F0≥30。非121℃時的F0值按下公式進行計算：

：滅菌時間；
Z：滅菌溫度系數，Z通常取10；
3.5工藝參數設定

項目	溫度/運行時間
空載熱分布測試	121℃/30min
滿載熱分布測試	121℃/30min
滿載熱穿透測試及微生物挑戰測試	121℃/30min

4驗證類別
再驗證
5驗證前準備
5.1驗證人員及職責
5.1.1 QC
5.1.1.1負責起草、審核驗證方案和報告；負責對參與驗證的所有人員進行方案的培訓，確定所有人員有能力實施本方案。
5.1.1.2按照驗證方案執行驗證，收集驗證數據并分析、總結報告；
5.1.1.3負責記錄驗證執行過程中出現的所有偏差，對關鍵的偏差應調查，在偏差關閉之前不得執行隨后的驗證工作。
5.1.2質量部
5.1.2.1負責審核驗證方案和報告；
5.1.2.2負責驗證過程樣品的檢測。
5.1.2.3負責審核方案和驗證報告；
5.1.2.4參與驗證過程偏差的調查；
5.1.2.5負責驗證技術支持；
5.1.2.6負責對環境進行監測；
5.1.3質量負責人
5.1.3.1負責批準驗證方案和報告。
5.1.2驗證小組成員及分工
 

姓名	部門	在本驗證小組中擔任的職務	崗位	職責
柴景明	質管部	組長		負責方案的起草，對驗證方案進行培訓并組織實施。
	質管部	組員	質微生物檢驗員	負責設備運行前各項目檢查及設備運行的操作。
	質量部	組員		負責生物指示劑的培養檢測。
王瑩	質量部	組員		監督過程的實施，并負責取樣

5.1.3人員資格審查及方案培訓的確認
本驗證小組所有成員在驗證之前應接受相關的培訓，如驗證方案、設備操作SOP、安全注意事項等，并有記錄。培訓記錄見附表1《人員培訓記錄》。

審查項目	審查方法	存放地點
人員培訓檔案	檢查職工培訓記錄卡	職工檔案
驗證方案的培訓記錄	檢查培訓記錄卡	驗證報告

結論：
確認人/日期：                                     復核人/日期：
5.2驗證引用文件的確認
5.2.1審查項目、審查方法、接受標準

審查項目	審查方法	接受標準
文件的審批	檢查文件	文件經有資格的人員起草、審核和批準
文件的執行	檢查文件	文件在執行期內

5.2.2驗證引用文件的確認

序號	文件/資料名稱	文件編碼	執行日期	版本號
1	濕熱滅菌標準操作規程
3	***滅菌標準操作規程
4	潔凈服、潔凈鞋滅菌標準操作規程
5	藥品生產驗證指南2003
6	驗證管理標準

結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
5.3儀器儀表校驗的確認
5.3.1審查項目、審查方法、接受標準

審查項目	審查方法	接受標準
校驗記錄	儀器儀表校驗記錄及其校驗合格證	儀器儀表都經過了校驗，且都在校驗期內、校驗結果為合格。

儀器儀表校驗的確認見附表2《儀器儀表校驗記錄》
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6驗證內容及合格標準
6.1相關條件的確認
6.1.1設備確認
6.1.1.1檢查方法：確認設備安裝位置及安裝牢固性，各附件完整性，檢查設備密封圈密封性能及滅菌器各接口處密封是否良好。
6.1.1.2接受標準：設備安裝位置正確，安裝牢固，各附件完整，密封圈密封性能及滅菌器各接口處密封良好，均符合技術參數要求和工藝要求。
6.1.1.3測試記錄：見附表3《設備確認記錄》。
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.1.2公用設施連接確認
6.1.2.1檢查方法：檢查滅菌柜是否連接電源、水源、管路開關等設施。
6.1.2.2接受標準：均已連接。
6.1.2.3測試記錄：見附表4《公用設施連接檢查記錄》。
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.1.3清洗確認
6.1.3.1檢查方法：要求用不脫落纖維的已清潔的抹布擦拭滅菌器內部。
6.1.3.2接受標準：清潔部位光亮，用潔凈抹布擦拭無黑點等異物。
6.1.3.3測試記錄：見原始記錄《濕熱滅菌器清潔記錄》。
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.1.4水位檢查。
6.1.4.1檢查方法：查看滅菌器內水位是否在現位器以上，以確認滅菌柜使用的水源是否合格。
6.1.4.2可接受標準：水位在現位器以上。
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.1.5  生物指示劑確認
6.1.5.1可接受標準：指示劑在有效期內；每支指示劑含芽孢不少于1×106。
6.1.5.2確認記錄

名稱	生產批號	有效期至	含芽孢量	D值	生產廠家
嗜熱脂肪芽孢 桿菌孢子生物指示劑（ATCC7953）

結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.2驗證步驟
6.2.1空載程序驗證
6.2.1.1空載熱分布測試
（1）將12支留點溫度計入滅菌室內。
（2）一支留點溫度計放在溫度控制傳感器旁，其于留點溫度計均置于腔室各處（留點溫度計分布見下圖），留點溫度計的測溫點不得與金屬其他表面接觸。

探頭分布整體透視圖
其他分布點的具體位置如上圖所示：
（3） 啟動滅菌器 ，達到滅菌溫度后，溫度應不低于121℃，運行30min。
（4）滅菌結束降溫后，取出溫度計記錄數據分析，如果符合空載熱分布測試的標準，依照此操作程序進行其余兩次測試。
（5）測試見附表7《空載熱分布測試記錄》。
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.2.1.2滿載熱分布測試
（1）最大裝載量的確認:
裝載方式：無菌服；（8件/包）；細布20塊、****。

（2）滿載熱分布測試
A、在滅菌器中按最差裝載方式放入****物品，把12支留點溫度計按照熱分布探頭布局圖（照片見附表16）所示放入室內。
B、啟動滅菌器，達到滅菌溫度后，溫度應不低于121℃，運行30min。
C、滅菌結束降溫后，取出溫度計記錄數據并分析，如果符合滿載熱分布測試的標準，依照此操作程序進行其余一次測試。
D見附表8《滿載熱分布測試記錄》。
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
6.2.1.3熱穿透實驗
(1）打開滅菌器，按照指定的最差裝載方式將被滅菌物品放置在腔室中，隨后將12個溫度計按預先確定的布點圖，放置在被滅菌物品內部，同時每只溫度計上放置一個生物指示劑，其中在最差裝載條件下得出的冷點位置放置兩個生物指示劑，上蓋密封。
(2） 使用嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑Bacillus stearothermophilus。
(3）啟動滅菌器，達到滅菌溫度后，溫度應不低于121℃，運行30min。
(4）滅菌結束，待冷卻后，立即取出所有生物指示劑，進行微生物培養。
(5）分別在嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑培養基中培養，培養溫度55-60℃，24h后、48h后及7天后記錄指示劑變化情況，并記錄，同時取一支未經處理的生物指示劑作為陽性對照。
(6）培養后的生物指示劑如有任何一支指示劑變黃，則表明有細菌生長，如果顏色沒有變化，則表明滅菌有效。
(7）滅菌結束降溫后，取出溫度計記錄數據并分析。
(8）見附表9-11《滿載熱穿透測試記錄》、《生物指示劑測試記錄》《生物指示劑孢子數量確認記錄》。
結論：
 
確認人/日期： 
6.2.1.4滅菌后物品質無菌檢查 
（1）測試程序：滿載測試時，每次選取接近滅菌柜最冷點的物品兩套。同時將上述三批物品放置至有效期（24小時）后，再進行一次無菌檢查。
（2）檢查方法
A、滅菌后檢查：按照《潔凈區微生物監測標準操作規程》對滅菌后的物品進行菌落檢查。接觸面積24～30cm2，迅速蓋好蓋，放入30～35℃倒置恒溫培養72小時，同時取三個空白雙碟做陰性對照，計菌落數，填寫《物品菌落檢測記錄》。
B、有效期檢查：將物品存放在**** 級下，放置24小時后取出，按照按照《潔凈區微生物監測標準操作規程》進行檢測，樣品編號分別為（A24、、、、、、、、）。
C 標準：滅菌后及放置到有效期后的物品菌落數為0，檢查合格率100%?？瞻着囵B基對照均無菌生長。
D、見附表12-13《物品菌落檢測記錄Ⅰ》、《物品菌落檢測記錄Ⅱ》
結論：
確認人/日期：                                    復核人/日期：
 
 
                                   復核人/日期：
6.3 驗證合格標準

項目	溫度/運行時間
保壓實驗	壓力達到0.15MPa,保持15min，密封圈無泄漏。
連續三次空載熱分布	溫度計全部在121℃―123℃，滅菌時間≥30min，滅菌溫度波動≤2℃，滅菌溫度均勻性≤±1℃。
連續三次滿載熱分布	溫度計全部在121℃―123℃，滅菌時間≥30min，滅菌溫度波動≤2℃，滅菌溫度均勻性≤±1℃。
連續三次滿載熱穿透實驗及生物指示劑實驗	各點溫度均在121.1℃以上，滅菌時間≥30min，Fo值≥30min。 在55-60℃下嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑培養7天后，指示劑不變色，對照樣在24h內，指示劑變黃色。
滅菌后物品無菌檢查	滅菌后及放置到有效期后的物品菌落數為0，檢查合格率100%?？瞻着囵B基對照均無菌生長。

 
6.4數據統計及分析
對驗證結果進行數據統計分析確認脈動真空滅菌柜測試符合要求。
7偏差分析
對驗證過程中所發生的偏差進行處理和分析，并制定糾正預防措施，必要時要重新進行驗證。如有偏差，要完成偏差處理與分析報告表。見附表15。
在驗證過程中如果出現個別項目的不合格情況，應該對不符合項進行偏差分析，找出原因進行整改。對不符合項重新確認。
在檢測過程中如果出現檢測項目不合格的情況，認真分析原因，如果屬系統問題，進行整改，整改后重新驗證。如果是取樣或化驗原因，重新取樣對不合格的指標重新化驗。
結論：
                                   評價人/日期：
8變更處理
本方案在實施過程中如發生變更，應將與變更有關的所有信息記錄下來，并進行分析與評價，填寫驗證變更申請表。見附表16。
結論：
                                   評價人/日期：
9驗證總結及評價
通過對滅菌器性能的檢測結果進行數據分析總結，確認滅菌器及輔助系統的每一部分功能都能達到生產工藝要求，由驗證小組組長對驗證過程及結果進行綜合評價，評價所要驗證的內容是否已達到驗證合格標準，驗證結論是否有效。確定本次驗證的結論。
結論
 
                                  
                     評價人/日期：
10再驗證周期
滅菌器驗證周期為1年；發生以下變更時，需要再驗證：
（1）設備更換、改造或大修后；滅菌工藝發生改變；
（2）滅菌物品發生改變；
（3）滅菌物品裝載形式、裝載量發生變化。
 
11文件的修訂
根據本方案實施過程中所發現的問題，對相應的SOP進行補充和完善，補充及完善的內容列入下表中。

文件編號	文件名稱	修訂內容

12附表及附錄
附表清單

序號	編號	名稱
1		培訓確認表
2		儀表校驗檢查記錄
3		設備確認記錄
4		泄漏測試記錄
5		空載熱分布測試記錄
6		滿載熱分布測試記錄
7		滿載熱穿透測試記錄
8		生物指示劑測試記錄
9		生物指示劑孢子數量確認記錄
10		物品菌落檢測記錄Ⅰ
11		物品菌落檢測記錄Ⅱ
12		偏差處理與分析報告
13		驗證變更申請表

 
附表1培訓確認表
培訓確認表                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                           
編號：              版本號：00                           第1頁共1頁

主講人			日期
培訓 內容
參加人員：
確認內容
該驗證所有參與成員均經過了培訓且能勝任本次驗證工作					□ 是       □ 否
備注：
確認人/日期

 
 
 
 
附表2 儀表校驗檢查記錄
儀表校驗檢查記錄
編號：           版本號：00                       第1頁共1頁

儀表名稱	型號	編號	有效期至	檢查結果	檢查人	檢查日期
溫度傳感器
壓力變送器
溫度驗證儀

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
附表3設備確認記錄
 
設備確認記錄
編號：                 版本號：00                    第1頁共1頁

檢查項目	檢查方法	檢查結果	檢查人	檢查日期
設備型號	檢查設備銘牌	是 □ 否 □
設備定位	檢查滅菌器安裝地點和位置，在***	是 □ 否 □
材質	該蒸汽滅菌柜，采用316L不銹鋼材料制作，密封圈材料為硅橡膠	是 □ 否 □
外觀	確認機器外觀是否良好，無缺陷和損壞	是 □ 否 □
操作與維護	有足夠的空間進行操作和維護	是 □ 否 □
加熱形式	電加熱	是 □ 否 □
加熱功率	按說明書技術參數	是 □ 否 □
儀表型號	能滿足工藝要求	是 □ 否 □
動力電源	三相四線、接地良好	是 □ 否 □

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
附表5泄漏測試記錄
 
泄漏測試記錄
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測試日期	開始時間 t1	開始壓力 P1	結束時間 t2	結束壓力 P2	泄漏率    P2- P1           t2 - t1
標準	泄漏率標準：保壓15min,每分鐘不得超過0.13Kpa
檢查人/日期				復核人/日期